問:**近在做酵母雙雜交,有些營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基要單獨加氨基酸,不知道這些氨基酸配成母液以后能不能高溫高壓滅菌?。空埜魑桓呤种附?,謝謝!
答:一般來說,在配制培養(yǎng)基過程中,在高溫高壓過程中易配破壞的成分如葡萄糖,氨基酸,抗生素等,多采用0.22um的濾膜過濾除菌。所以,建議樓主**好,過濾除菌后單獨加入。
問:基酸不能高壓滅菌嗎?可是在測定蛋白質(zhì)中氨基酸含量的時候,酸解的條件可是110℃濃鹽酸的條件下啊,這個反應(yīng)里的氨基酸可是可以跑HPLC的,而且氨基酸也基本不存在空間構(gòu)像問題。我在有些文獻(xiàn)中見過氨基酸用121℃滅菌15min的。不知大家有何意見?
答:你的培養(yǎng)基中含有葡萄糖等具有醛基的物質(zhì),氨基酸與葡萄糖等在高溫下發(fā)生麥拉德反應(yīng)生成羰氨化合物降低了氨基酸的含量,另外這些物質(zhì)使培養(yǎng)基顏色加深,甚**對微生物產(chǎn)生毒害作用。一般來說將氨基酸過濾除菌,在培養(yǎng)基冷卻到五六十度的時候加入即可。
答:請參考G標(biāo),可以測定高溫后的含量變化,其實就是個驗證實驗,當(dāng)然樣品必須是單獨滅菌的了。Good luck!